Q：为什么你们公司的许多配方都不含L-谷氨酰胺呢？

A：L-谷氨酰胺在液体中容易发生水解，其水解副产物可能对细胞产生毒性。此外，L-谷氨酰胺的必要浓度经过一段时间后也可能会受到影响。由于L-谷氨酰胺是一种必需氨基酸，终端客户最好在培养基中添加推荐浓度的新鲜L-谷氨酰胺。

Q：冷冻和解冻会对我的血清产生什么影响？

A：通常情况下，我们不建议多次冻融血清。血清含有蛋白质、脂质和其他成分，这些成分可能会根据解冻或冷冻的速度，从溶液中发生不同的分离或沉淀，这可能会对血清的效果产生不利影响。最佳的储存方式为冷藏于-20°C以下。

Q：如何防止细胞培养中的支原体污染？

A：在任何实验室的应用中都应该使用良好的无菌技术。良好的预防方法就是检测所有与细胞接触的材料。并且应定期进行检测，以确保支原体不会被引入至细胞培养物中，以及确定所有潜在的污染源。

Q：当将细胞从含血清培养基改为无血清培养基时，直接和驯化适应法中哪一个更好？

A：推荐使用驯化适应法。驯化适应可以使细胞逐渐适应新的无血清环境。以下为示例方案之一，细胞类型各不相同，请联系我们量身制定解决方案。

推荐的驯化适应方案：

1. 从高细胞密度和高存活率 (>80%) 的培养物（悬浮或贴壁）开始。如果细胞为贴壁细胞，则需要使用胰蛋白酶消化法。

2. 使用所需的最终无血清培养基作为稀释液，以1：2的比例稀释细胞。

3. 孵育细胞至最大细胞密度。

4. 再次稀释细胞。该稀释比例可取决于细胞是贴壁生长还是悬浮培养。对于贴壁细胞，可尝试根据其融合度以1：2或1：3进行稀释。对于悬浮细胞，可尝试以1：3~1：5或约每毫升3-4×10⁵个细胞。

5. 继续孵育至最佳细胞密度。（最大值可能意味着过度融合，一般情况下应当避免。）

6. 监测相对于在原始培养基或对照培养基中培养的细胞生长及活性。已成功适应无血清培养基的细胞理应具有85%以上的活性，其倍增时间与适应培养物的对照培养基（含血清或其他无血清培养基）相同。

7. 存活率低或倍增时间延长表明该培养物可能尚未适应。可能需要以1：2~1：3进行3~5次的连续稀释。某些细胞还需要0.1%~0.5%血清的情况并不少见。

8. 适应无血清条件的时间将随着特定细胞类型的生长特征而变化。如果在无血清驯化过程中，培养活性下降至80%以下，或倍增时间显著延长，则可能是无血清驯化进度太快了。在重新开始连续无血清驯化之前，细胞可能需要在先前的稀释倍数下先进行几次传代。

Q：可以定制无血清培养基吗？

A：我们提供的所有配方均可量身定制，能够满足客户的特定需求。无论重点在于优化产量或提高生产力，都可以为任意实验室量身定制以满足特定需求。

Q：在无血清、无动物成分和化学成分明确的培养基方面，FUJIFILM Irvine Scientific 能提供的有哪些？

A：FUJIFILM Irvine Scientific可提供多种无血清培养基，包括目前用于生物生产和生物加工的三种主要细胞类型的产品：中国仓鼠卵巢（CHO）细胞、HEK293细胞和杂交瘤细胞。每种细胞系可提供一套生长培养基和养料。

CHO细胞：

BalanCD CHO生长培养基和饲料是化学成分限定的，不含动物源成分，配方中不含L-谷氨酰胺、次黄嘌呤和胸苷，可用于各种应用。BalanCD CHO Feeds专门设计用于提高CHO细胞中抗体和重组蛋白的加工产量。

BalanCD 转染培养基是在 CHO培养系统均为化学成分限定且不含动物源成分。该系统专为CHO细胞中的瞬时转染而设计，以实现更高的有效性并确保过程的一致性。

HEK293细胞：

BalanCD HEK293系统平台包含生长培养基、补料和抗结块补充剂。这个可扩展的平台确认使用化学成分限定且不含动物源成分，并针对病毒载体的生产和瞬时蛋白表达进行了优化。

杂交瘤细胞：

IS MAB-CD是一种化学成分限定的低蛋白培养基，适用于重组单克隆抗体的生产中杂交瘤和骨髓瘤细胞系的生长。 与其他非化学成分配方相比，这种化学成分明确的培养基符合监管要求，可提高批次间的一致性。

Q：为什么要使用无血清培养基？

A：无血清培养基能为客户提供更好的批次间一致性，与含有不确定成分（如血清）的培养基相比，它们所含的不确定成分更少。终端用户也无需花时间去验证不同批次间FBS的活性。无血清培养基的蛋白质含量低于添加血清的培养基，可简化纯化步骤并提高最终产品的产量。

Q：无血清、无蛋白质和化学成分明确的培养基之间有什么区别？

A：无血清培养基不含或无需添加血清。无动物源成分培养基是指其中没有任何成分来源于动物的培养基。无蛋白质培养基不含任何蛋白质。化学成分限定培养基（或化学成分明确培养基）所包含的成分均为已知的（化学成分可定义)。