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ISOGEN、ISOGEN-LS
RNA提取试剂

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RNA提取试剂



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ISOGEN

(从左到右200 mL,100 mL,50 mL



ISOGEN


  ISOGEN是从人、动物、植物及细菌提取RNA试剂。可通过液相分离方法从同一样本中分离DNA及蛋白质。可通过一系列的操作分离RNA、DNA、蛋白质,有助于分析珍贵的样本。操作简单,便于样本数量较多的检测。

  适用样本:组织、细胞、植物、细菌


ISOGEN-LS


  ISOGEN-LS是从血液或血清等容量较大(>100 µL:使用1.5 mL塑料(离心)管进行处理),难以浓缩的液体样本中提取RNA的试剂。是将ISOGEN针对液体试剂进行改良。除了加入到样本的ISOGEN-LS量比不一样以外,得到的结果与使用 ISOGEN时一样。

  适用样本: 全血、液体样本



◆原理


  本产品是含有苯酚及硫氰酸胍的均一液体。往样本加入ISOGEN或ISOGEN-LS后使其溶解或均匀化,再加入氯仿进行离心分离,匀浆就会分离成水相、中间相及有机相。水相中只有RNA,DNA及蛋白质存在于中间相及其以下。首先,取出水相,加入异丙醇使RNA沉淀。往剩余的中间相及有机相里加入乙醇使DNA沉淀,加入异丙醇使蛋白质沉淀,从而依次分离出RNA、DNA及蛋白质。


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◆特点


  ・主要成分为苯酚及硫氰酸胍的均一溶液

  ・便于液层分离的染色溶液(ISOGEN : 蓝色、ISOGEN-LS : 红色)

  ・可通过一系列的操作分离RNA、DNA、蛋白质

  ・操作简单、迅速 (RNA分离用时: 约1个小时、DNA : +2小时、蛋白质: +2.5小时)

  ・高回收率、组织及培养细胞样本请使用ISOGEN

  ・血液等容量大,难以浓缩的液体样本请使用ISOGEN-LS



◆产品列表



ISOGEN (10 mL、50 mL、100 mL、200 mL)

产品

容量

保存

备注

ISOGEN

1瓶

2~10°C
  (遮光)

  非医疗用,剧毒物
  外观:蓝色溶液
  容器(塑胶瓶)存放于保管袋。



 

ISOGEN-LS (10 mL、100 mL)

产品

容量

保存

备注

ISOGEN-LS

1瓶

2~10°C
  (遮光)

  非医疗用,剧毒物
  外观:红色溶液
  容器(塑胶瓶)存放于保管袋。



运输方法


  本品在室温下运输。产品到达后,在2~10℃条件下保存即可正常使用。



◆使用案例


操作步骤


RNA分离

DNA分离

蛋白质分离

操作流程1-1 RNA分离

操作流程2 DNA分离

操作流程3 蛋白质分离

操作流程1-2 微量样本RNA分离

操作流程1-3 植物样本RNA分离

  

ISOGEN及ISOGEN-LS的操作流程请参考产品说明



实验数据一览


  · 取量的标准

  · <ISOGEN>ISOGEN法与硫氰酸胍-氯化铯(GT-CsCl)超速离心法比较

  · <ISOGEN>ISOGEN法分离总RNA电泳

  · <ISOGEN>ISOGEN法分离RNA、DNA及蛋白质Northern、Southern、Western印迹法

  · <ISOGEN-LS>ISOGEN法分离hepatitis C viral (HCV) RNA的RT-PCR



◆注意事项


  · 如果您对试剂的基本的知识不了解,请不要使用。

  · ISOGEN及ISOGEN-LS是非医疗用医剧毒物(苯酚制剂),请小心操作。

  · 使用时请穿着适当的防护设备(手套、眼镜等)。

  · 如果接触皮肤或眼睛,请用大量的水冲洗15分钟或以上,并及时就诊。

  · 请按照说明书进行操作。

  · 对于因不按照说明书操作而导致的事故,Nippon Gene不负任何责任。



◆备注


  本产品是实验研究用试剂,请勿用作医疗用途。



◆资料 Data Sheet

产品手册

  · ISOGEN,ISOGEN-LS 产品说明书(H18年7月修订版) PDF 92KB


SDSSafety Data Sheet

  · ISOGEN  安全标签(PDF

  · ISOGEN-LS  安全标签(PDF



◆相关产品


  · ISOGEN II total RNA及small RNA抽提试剂 

  · ISOGEN with Spin Column RNA抽提试剂

  · Ethachinmate 用于从微量样本抽提RNA的酒精沉淀共沉淀剂

  · 缓冲剂

  · Deoxyribonuclease(RT Grade)for Heat Stop

  · Deoxyribonuclease(RT Grade)

  · DNase I (RNase free)







Q:从革兰氏阳性菌提取RNA的方法

A:总体来说,革兰氏阳性菌的细胞壁较厚,普通的操作流程回收到的RNA的量比革兰氏阴性菌少。因此,使用玻璃珠(0.1 - 0.15 mm)破坏

    革兰氏阳性菌的细胞壁后,用ISOGEN提取RNA。

    使用ISOGEN从革兰氏阳性菌抽提RNA - CN.pdf



Q:从酵母提取RNA的方法

A:酵母的细胞壁较厚,仅仅进行普通的ISOGEN/ISOGEN-LS处理,难以回收RNA。因此,使用作用于β -1,3结合的葡萄糖聚合物的 Zymolyase

    对细胞壁进行溶解,提取RNA。

    使用ISOGEN/ISOGEN-LS从酵母抽提RNA -CN.pdf



Q:从骨头提取RNA的方法

A:使用ISOGEN从大鼠脊椎提取总 RNA,并检测其回收量及纯度。  

    使用ISOGEN从骨头抽提RNA  - CN.pdf



Q:可以分开提取小RNA和高分子RNA吗?

A:本产品无法分开回收小RNA和高分子RNA,但是本产品的升级产品ISOGEN II可以分开回收高分子RNA(>200 bases)和小RNA

    (<200 bases)。

        分离操作流程(前往ISOGEN II 产品页面链接)



参考文献


  [ 1 ] Chomczynski, P. and Sacchi, N.: Anal.Biochem.162, 156 (1987)

  [ 2 ] Chomczynski, P.: BioTechniques, 15, 532 (1993)

  [ 3 ] Chomczynski, P., Bowser-Finn, R. and Sabatini, N.: The Jounal of NIH Research, 6,83 (1994)

  [ 4 ] Chomczynski, P. and Mackey, K., BioTechniques, 19, 942-945 (1995)


License

  Licensed by Molecular Research Center, Inc.




产品列表
产品编号 产品名称 产品规格 产品等级 备注
315-02504 ISOGEN 10 mL - -
317-02503 ISOGEN 50 mL - -
311-02501 ISOGEN 100 mL - -
- ISOGEN 200 mL - -
317-02623 ISOGEN-LS 10 mL - -
311-02621 ISOGEN-LS 100 mL - -

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