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无DMSO的皮肤及神经组织用冷藏保存液
ThelioKeep®

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ThelioKeep®




ThelioKeep是一种不含DMSO和血清蛋白,适用于上皮、内皮组织以及神经组织的冷藏保存液。



 本产品仅供研究使用。研究以外不可使用。


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◆特点•优势

 

● 维持物理性质上较为脆弱的组织膜形态,保持增殖功能的同时可冷藏(4~10°C)保存1~2周。

● 在绿茶茶多酚(表没食子儿茶素没食子酸酯:EGCG)的保护作用下,可保存薄且脆弱的组织。

● 除上皮、内皮组织之外,也可用于神经组织使用。末梢神经可维持电生理功能。

● 适用于包含人、小鼠、大鼠在内的大多数哺乳动物组织。

● 保存后的组织经过清洗,可用于使用了适当培养基的各种实验。

● 不含血清以及蛋白成分,DMSO、甘油等防腐剂。

● 已通过无菌测试确认本产品不含细菌、真菌、支原体。

● 本产品由液体、固体防腐剂各一支组成套装,未开封(制备前)的状态下可在4°C下保存约1年。

● 成分:无机离子,D-葡萄糖,氨基酸,pH调节剂(液体防腐剂),表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG),

● 酚红(固体防腐剂)



◆应用实例1


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比较人角膜内皮组织的形态以及增殖速度

用本产品(右)和其他公司产品(左)保存人角膜内皮组织2周(4°C)后比较其形态(左图)。使用本产品保存的组织可维持六角形的细胞膜形态。相反,使用其他公司产品保存的组织的细胞膜形态已完全消失。另外,已确认使用本产品保存的组织以约2倍的速度增殖(右图)。




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比较神经组织的形态以及电导率

用本产品(右)或其他公司产品(左)保存大鼠末梢神经组织2周(4°C)后,移植到另一只大鼠,再经过24周后取出,使用透射电子显微镜观察形态(左图)与运动神经传导速度(MCV:右图)。新鲜组织表示未经保存的神经移植后的数值。

假设移植前神经的MCV值为100%。可确认使用本产品保存的组织在移植24周后仍然保持形态不萎缩并保持完好的功能。

图像中柱状长度为20 μm。



参考文献

Ikeguchi, R., et al., Experimental Neurology184, 688~696 (2003).

Ikeguchi, R., et al., Transplantation79, 688~695 (2005).



◆应用实例2


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使用本产品保存的人培养骨膜片进行二次培养时的增殖情况

将培养了21天的人培养骨膜片在4°C下保存2天后,再次进行培养。



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川濑老师(右)与研究室的成员


数据提供:新泻大学牙科系 牙科基础移植、再生医学领域 川濑知之老师

参考文献:Kamiya, M., et al., Biopreservation and Biobanking10 (3), 245~252 (2012)



◆应用实例3


人来源培养口腔黏膜上皮细胞片保存前后的评估

(1)培养上皮细胞片的回收试验(2)总细胞数


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(3)培养上皮细胞切片中的细胞活率


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(4)HE染色图


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保存前



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保存后



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保存后



● 细胞:人来源培养口腔黏膜细胞片

● 培养皿: 35 mm UpCell(R)(CellSeed株式会社)

● 培养条件:37°C ,5%CO2 14天

● 保存条件:4°C,7天

将人来源口腔粘膜上皮细胞放在35 mm UpCell(R)中与NIH-3T3共培养14天,制备培养上皮细胞片。

然后,将培养上皮细胞片浸于各种保存液(PBS、ThelioKeep(R))中,在4°C下静置7天。

保存后的第7天,进行(1)回收细胞片;(2)总细胞数;(3)细胞活率检测(使用流式细胞仪分析7-AAD染色)以及(4)HE染色,比较保存前后的状态。


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香取老师(第一列右)、林老师(中间)与研究室的成员


数据提供:大阪大学 研究生院 医学研究科 脑神经感应外科 眼科 香取良祐老师、林龙平老师



◆操作方法概要


1. 在无菌条件下向附带的含有防腐剂(EGCG)的微管中加入约0.5 mL本产品并溶解,溶解后将所有溶液倒回

1. ThelioKeep的瓶中并搅拌。

2. 确认防腐剂完全溶解后,向离心管等容器加入数mL溶液,在4~10°C下冷却。

3. 将从实验动物中切除的上皮、内皮组织浸没于上一步的溶液中,盖好盖子在4°C下保存。

4. 使用预冷PBS轻轻清洗上一步保存的组织后,转移至实验用培养基中,在组织存活状态下用于实验。

 

※ 所制备溶液请尽快使用。分装时可在-20°C下保存1~2周。

※ 培养时,请提前将保存液恢复到正常生理活性温度(如37°C)。

※ 在制备切片等组织标本时,请快速将其固定。

※ 提取组织内的物质时,请提前在预冷的PBS中仔细清洗


 


产品列表
产品编号 产品名称 产品规格 产品等级 备注
TPO-A1 ThelioKeep
 皮肤组织保存液
100ml -

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