LabAssay™ NEFA｜产品中心｜试剂-富士胶片和光FUJIFILM Wako

产品中心 > 生命科学 > 疾病研究 > 代谢&糖尿病&肥胖症

LabAssay™ NEFA
LabAssay™ 游离脂肪酸检测试剂盒

产品特性
相关资料
Q&A
参考文献

LabAssay™ NEFA

LabAssay™ 游离脂肪酸检测试剂盒

在血液中NEFA（Non-esterified Fatty Acid：游离脂肪酸）与白蛋白结合，被转运至外周组织，成为外周组织重要的能源来源。游离脂肪酸的浓度通过脂肪组织释放、外周组织消耗以及肝脏摄取进行调节。

本产品采用了基于酰基辅酶A合成酶（ACS）、酰基辅酶A氧化酶（ACOD）和3-甲基-N-乙基-N-（β-羟乙基）-苯胺（MEHA）的蓝紫色显色酶法。不可用于体外诊断。

◆检测原理

样品中的游离脂肪酸（NEFA）在酰基辅酶A（Acyl-CoA）和腺苷- 5'-三磷酸二钠（ATP）存在下，通过酰基辅酶A合成酶（ACS）的作用，生成酰基辅酶A、AMP以及焦磷酸（PPi）。生成的酰基辅酶A在酰基辅酶A氧化酶（ACOD）的作用下被氧化，同时生成2,3-反式烯酰辅酶A（2,3-trans-Enoyl-CoA）和过氧化氢。生成的过氧化氢在过氧化物酶（POD）的作用下，与3-甲基-N-乙基-N-（β-羟乙基）-苯胺（MEHA）和4-氨基安替比林（4-Aminoantipyrine）进行定量氧化缩合，生成蓝紫色色素。通过测定这种蓝紫色的吸光度，即可计算样品中的NEFA浓度。

◆性能

●　标准曲线范围：0.4～1.97 mEq/L

●　检测时间：约 20 min

●　样品：血清、血浆（小鼠、大鼠、人、犬、猫）

●　所需样品量：4 μL

●　测定波长：550 nm

◆试剂盒组成

１．显色剂A——10 mL用×4瓶

２．显色剂A溶解液——45 mL×1瓶

３．显色剂B——20 mL用×4瓶

４．显色剂B溶解液——90 mL×1瓶

５．标准溶液（油酸1 mEq/L）——7 mL×1瓶

５． ※ 油酸1 mEq/L=1 mmol

◆标准曲线示例

◆检测操作方法

微孔板法

按下表条件进行反应。

No.	标准溶液	蒸馏水或去离子水	样品量	浓度
1	80 µL	120 µL	4 μL	0.40 mEq/L
2	120 µL	80 µL	4 μL	0.60 mEq/L
3	160 µL	40 µL	4 μL	0.80 mEq/L
4	未经稀释	-	4 μL	1.00 mEq/L
5	未经稀释	-	8 μL	1.97 mEq/L^*1

*1：样品量通常是4 μL, 但在这里使用了8 μL。NEFA的浓度需要根据上表校正。

	Test	标准	空白对照	样品盲检^＊２
显色试剂 A	80 μL	80 μL	80 μL	80 μL
待测物	血清 4 μL	标准溶液 4 μL	蒸馏水或去离子水 4 µL	―
充分混合^＊3、37 ℃加热10 min。
显色试剂 B	160 μL	160 μL	160 μL	160 μL
待测物	―	―	―	血清 4 μL
充分混合^＊3、37 ℃加热10 min。
恢复至室温，在30 min内以空白作为对照，测定样品和标准溶液的吸光度。
550 nm 吸光过滤

*2：普通的样品无需样品盲检。请使用乳糜血清或溶血血清进行测试。

*3：使用板式搅拌机，在600~1000 rpm下搅拌1 min左右。

◆加标回收测试

NEFA的加标回收测试，将已知含量的标准品加标到人、小鼠、大鼠样品中，n=2。

人样品

人样品	添加量（mEq/L）	测定值（mEq/L）	回收量（mEq/L）	回收率（%）
血清样品	-	0.69
	0.4	1.14	0.45	111.80%
	0.61	1.34	0.64	105.70%
	0.78	1.54	0.85	108.50%
	1.01	1.73	1.03	102.30%
血浆（EDTA）样品	-	0.28
	0.4	0.7	0.43	105.30%
	0.61	0.9	0.62	102.50%
	0.78	1.12	0.84	106.80%
	1.01	1.34	1.06	105.40%

小鼠样品

小鼠样品	添加量（mEq/L）	测定值（mEq/L）	回收量（mEq/L）	回收率（%）
血清样品	-	0.7
	0.4	1.07	0.37	91.70%
	0.61	1.31	0.61	100.10%
	0.78	1.44	0.74	94.50%
	1.01	1.62	0.92	91.30%
血浆（EDTA）样品	-	0.62
	0.4	0.99	0.37	92.50%
	0.61	1.29	0.68	111.50%
	0.78	1.38	0.77	97.80%
	1.01	1.62	1	99.10%

大鼠样品

大鼠样品	添加量（mEq/L）	测定值（mEq/L）	回收量（mEq/L）	回收率（%）
大鼠血清样品	-	0.57
	0.4	1	0.43	106.40%
	0.61	1.21	0.65	106.20%
	0.78	1.4	0.83	106.40%
	1.01	1.57	1.01	99.70%
大鼠血浆（EDTA）样品	-	0.41
	0.4	0.86	0.45	111.50%
	0.61	1.07	0.66	108.50%
	0.78	1.27	0.86	109.50%
	1.01	1.44	1.02	101.40%

培养基样品

样品	添加量（mEq/L）	测定值（mEq/L）	回收量（mEq/L）	回收率（%）
50%培养基 +标准品	-	0.03	-	-
	0.374	0.409	0.38	101.60%
	0.683	0.71	0.68	99.60%
	0.829	0.812	0.782	94.40%
	1.013	1.059	1.03	101.70%

◆样品检测示例

人血清样本

测定值（mEq/L）

mean

CV（%）

混合人血清，男性

0.686

0.688

0.687

0.001

0.2

混合人血浆

（K2EDTA），男性

0.354

0.35

※0.352

0.003

0.8

※参考值

20%稀释CD-1（ICR）雄性小鼠正常血清

序号	测定值（mEq/L）		Mean（mEq/L）	SD	CV（%）
1	1.119	1.117	1.118	0.001	0.1
2	0.783	0.793	0.788	0.007	0.9
3	0.7	0.731	0.715	0.022	3.1
4	0.795	0.792	0.794	0.002	0.2
5	0.825	0.833	0.829	0.005	0.6

100%CD-1(ICR)雄性小鼠正常血浆（K2EDTA）

序号	测定值（mEq/L）		Mean（mEq/L）	SD	CV（%）
1	0.311	0.308	※0.309	0.002	0.6
2	0.319	0.321	※0.320	0.002	0.6
3	0.202	0.208	※0.205	0.004	2
4	0.173	0.185	※0.179	0.008	4.6
5	0.293	0.318	※0.305	0.017	5.6

※参考值

10％稀释雄性Sprague Dawley大鼠正常血清

序号	测定值（mEq/L）		Mean（mEq/L）	SD	CV（%）
1	0.3	0.3	※0.300	0	0
2	0.373	0.368	※0.371	0.004	1.1
3	0.301	0.277	※0.289	0.017	5.8
4	0.365	0.364	※0.365	0	0.1
5	0.403	0.362	※0.382	0.029	7.6

※参考值

100％雄性Sprague Dawley大鼠正常血浆（K2EDTA）

样品批次	测定值（mEq/L）		Mean	SD	CV（%）
RAT432145	0.336	0.33	※0.333	0.004	1.2
RAT432146	0.358	0.354	※0.356	0.003	0.8
RAT432147	0.311	0.339	※0.325	0.02	6
RAT432148	0.222	0.214	※0.218	0.005	2.6
RAT432149	0.522	0.508	0.515	0.01	1.9

※参考值

◆样品检测示例

100%雄性比格犬正常血清

序号	测定值（mEq/L）		Mean（mEq/L）	SD	CV（%）	年龄
1	0.654	0.657	0.656	0.0027	0.4	4
2	0.642	0.688	0.665	0.032	4.8	6
3	0.419	0.431	0.425	0.009	2	6
4	0.377	0.383	※0.38	0.0057	1.5	11
5	0.887	0.877	0.882	0.007	0.8	12
6	0.604	0.595	0.599	0.006	1.1	6
7	0.987	1.025	1.006	0.0267	2.7	10
8	0.501	0.51	0.506	0.006	1.2	4

※参考值

100%雄性比格犬正常血浆（EDTA）

序号	测定值（mEq/L）		Mean（mEq/L）	SD	CV（%）	年龄
1	0.44	0.444	0.442	0.0033	0.7	4
2	0.419	0.435	0.427	0.011	2.6	6
3	0.311	0.306	※0.308	0.0037	1.2	10
4	0.47	0.487	0.478	0.0123	2.6	12
5	0.472	0.475	0.473	0.005	1	6
6	0.37	0.364	※0.367	0.0047	1.2	11
7	0.789	0.77	0.78	0.0133	1.7	10
8	0.439	0.384	0.411	0.0387	9.4	12

※参考值

100% 雄性短毛猫正常血清

序号	测定值（mEq/L）		Mean（mEq/L）	SD	CV（%）	年龄
1	0.709	0.726	0.717	0.0117	1.6	3
2	0.628	0.642	0.635	0.01	1.6	3
3	1.004	1.003	1.004	0.0053	0.5	6
4	0.974	0.987	0.981	0.0093	0.9	4
5	0.624	0.649	0.636	0.017	2.7	6
6	1.175	1.212	1.193	0.0267	2.3	6
7	1.086	0.959	1.022	0.0893	8.8	1
8	0.371	0.393	※0.382	0.0157	4.1	1

※参考值

100％雄性短毛猫正常血浆（EDTA）

序号	测定值（mEq/L）		Mean（mEq/L）	SD	CV（%）	年龄
1	1.092	1.107	1.099	0.0103	0.9	0.5
2	0.177	0.172	※0.174	0.0033	2	1
3	0.243	0.24	※0.241	0.0043	1.7	3
4	0.32	0.319	※0.320	0.0067	2.2	0.5
5	0.363	0.354	※0.359	0.006	1.7	3
6	0.206	0.189	※0.197	0.012	6.2	3
7	0.232	0.199	※0.215	0.024	11.1	0.5
8	0.142	0.12	※0.131	0.016	12.3	1

※参考值

◆稀释线性度测试

点击了解LabAssay™全系列

※ 产品已更新，旧编号为：294-63601

参考文献

1）	Kobayashi, Y. et al. : J. Pharmacogn. Nat. Prod., online (2015). Effects of Morus alba L. (Mulberry) Leaf Extract in Hypercholesterolemic Mice on Suppression of Cholesterol Synthesis ※小鼠肝组织提取物
2）	Gao, F. et al. : Evid. Based Complement. Alternat. Med., 2015, 801291 (2015).Effect of Keishibukuryogan on Genetic and Dietary Obesity Models ※大鼠肝组织提取物
3）	Ogawa, K. et al. : Reprod. Med. Biol., online (2018). Non-esterified fatty acid-associated ability of follicular fluid to support porcine oocyte maturation and development ※猪卵泡来源卵泡液
4）	Wang, F. et al. : J. Mol. Endocrinol., 52, 133 (2014). LGR4 acts as a link between the peripheral circadian clock and lipid metabolism in liver ※小鼠血浆
5）	Uchida, K. et al. : Exp. Anim., 58, 181 (2009). Hyperlipidemia and hyperinsulinemia in the spontaneous osteoarthritis mouse model, STR/Ort ※小鼠血清

产品列表

产品编号	产品名称	产品规格	产品等级	备注
633-52001	LabAssay™ NEFA LabAssay™ 游离脂肪酸检测试剂盒	500 tests	-	-

免责声明

1. 本公司密切关注本网站发布的内容，但不保证发布内容的准确性、完整性、可靠性和最新性等。

2. 本公司不保证使用本网站期间不会出现故障或计算机病毒污染的风险。

3. 无论何种原因，使用本网站时给用户或第三方造成的任何不利或损害，本公司概不负责。此外，对于用户与其他用户或第三方之间因本网站发生的任何交易、通讯

3. 或纠纷，本公司概不负责。

4. 本网站可提供的所有产品和服务均不得用于人体或动物的临床诊断或治疗，仅可用于科研等非医疗目的。如任何用户将本网站提供的产品和服务用于临床诊断或治

4. 疗，以及其他特定的用途或行为，本公司概不保证其安全性和有效性，并且不负任何相关的法律责任。