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PA Tag 新型标签系统
PA Tag

PA tag新品速递图wako.jpg

亲和纯化标签蛋白!



  PA tag 系统是利用高亲和性&高特异性单抗(NE-1)识别肽标签(GVAMPGAEDDVV)的重组蛋白新型检测系统。PA tag 系统中的抗体琼脂糖可通过免疫沉淀法纯化 PA tag 融合蛋白,并可在洗涤后获得再生。中性 pH 条件下 PA tag 肽简单方便地竞争性洗脱 PA tag 融合蛋白。

  PA tag 系统的亲和性和特异性优于现有标签系统,抗体琼脂糖可再生 60 次,极大地降低成本,可用于免疫细胞化学、免疫印迹和流式细胞术,是动物宿主细胞重组蛋白生产的有效工具。



原理




载体列表


产品名称(载体名称)

抗性

规格

产品编号

大肠杆菌抗性

真核细胞抗性

pCAG-Ble PA tag-C

Bleomycin

20 μg

161-26861

pCAG-Ble PA tag-N Signal Plus

20 μg

168-26871

pCAG-Bsd PA tag-C

Blasticidin S

20 μg

165-26881

pCAG-Bsd PA tag-N Signal Plus

20 μg

162-26891

pCAG-Hyg PA tag-C

Hygromycin B

20 μg

165-26901

pCAG-Hyg PA tag-N Signal Plus

20 μg

162-26911

pCAG-Neo PA tag-C

Kanamycin

G418

20 μg

169-26921

pCAG-Neo PA tag-N Signal Plus

20 μg

166-26931



优点、特色





案例、应用


【使用例子:PA 标签抗体,大鼠单克隆抗体(NZ-1)】


  NZ-1 是特异性识别 PA tag(GVAMPGAEDDVV)的单克隆抗体,能用于检测动物细胞表达的 PA tag 融合蛋白,亲和性很高并能简单地用肽洗脱!已确认不存在交叉反应的物种包括小鼠、大鼠、仓鼠和犬类。


04.jpg



浓度:       标签表示(约1.0 mg/mL)

配方:       1× PBS(pH 7.5)水溶液

克隆号:    NZ-1

亚型:       IgG2a

应用:  免疫印迹 0.01 – 1 μg/mL  

                 免疫沉淀 10 – 50 μg/assay  

                 流式细胞术 0.1 – 10 μg/mL  

                 免疫细胞化学 0.1 – 10 μg/mL

保存条件:2–10°C 避免反复冻融



【NZ-1 Fab和PA肽的复合体结构分析】


06.jpg



标记抗PA tag抗体


PA tag-EGFP-6×His tag,重组,溶液





亲和标签比较


      亲和标签

     TARGET

             PA

       6 x His

       c-Mys

      HA

      GST

序列

(YPGQ)5V

GVAMPGAEDDVV

HHHHHH

EQKLISEEDL

YPYDVPDYA

-

残基数

21

12

6

10

9

218

分子量(kDa)

2.34

1.16

0.84

2.34

1.16

0.84

配位子

TARGET tag

PA tag

Ni, Co, Zn, Cu

c-Myc tag

HA tag

GST

抗体琼脂糖的

再利用

最高可再生循环利用40次

最高可再生循环利用60次

不可再生

不可再生

不可再生

不可再生

重组蛋白

纯化成本

+

+

+

++

++

+

单克隆抗体结合力(KD(M))(数字越小,亲和力越高)

1.0x10-8

4.9x10-10

Ni-NTA:

 1.0x10-5~6

2.2x10-9

2.8x10-9

Glutathione:

  1.0x10-5~6

亲和性

++++

+++++

+++

++++

++++

++++

和动物细胞外(培养基)的蛋白非特异性结合

+

+

+++++

+++

+++

++++

和动物细胞内蛋白的非特异性结合

+

+

++++

++++

+++

++++

肽洗脱

+++

+++

咪唑洗脱

++

++

谷胱甘肽洗脱


本比较表由富士胶片和光独立完成。样品、检测方法及手法不同有可能产生的特异性有变化,不能保证各种亲和标签的性能。

Target tag 系统和 Pa tag 系统同属Wako亲和标签系统,详情请联系经销商。        


 Wako新一代超亲和性的亲和标签系统“PA Tag System”http://labchem.fujifilm-wako.com.cn/resources/show/14.html


1. Fujii, Y. et al., "PA tag: A versatile protein tagging system using a super high affinity antibody against dodecapeptide

     derived from human podoplanin.", Protein Exp. Purif., 95, 240-247(2014).


2. Fujii, Y. et al. 新規アフィニティータグシステム“PAタグ”の利用法~蛋白質の精製および検出~蛋白質科学会アーカイブ, 7,e075

      (2014)


3. Kitago,Y et al.“ Structural basis for amyloidogenic peptide recognition by sorLA.”Nat Struct Mol Biol., 22(3):199-206(2015)




产品列表
产品编号 产品名称 产品规格 产品等级 备注
161-26861 pCAG-Ble PA tag-C 
 pCAG-Ble PA 标签-C
20 μg for Genetic Research -
168-26871 pCAG-Ble PA tag-N Signal Plus
 pCAG-Ble PA 标签-N 信号 增加型
20 μg for Genetic Research -
165-26881 pCAG-Bsd PA tag-C
 pCAG-Bsd PA 标签-C
20 μg for Genetic Research -
162-26891 pCAG-Bsd PA tag-N Signal Plus
 pCAG-Bsd PA 标签-N 信号 增加型
20 μg for Genetic Research -
165-26901 pCAG-Hyg PA tag-C 
pCAG-Neo PA 标签-C
2 0μg for Genetic Research -
162-26911 pCAG-Hyg PA tag-N Signal Plus
 pCAG-Hyg PA 标签-N 信号 增加型
20 μg for Genetic Research -
169-26921 pCAG-Neo PA tag-C
 pCAG-Neo PA 标签-C
20 μg for Genetic Research -
166-26931 pCAG-Neo PA tag-N Signal Plus
 pCAG-Neo PA 标签-N 信号 增加型
20 μg for Genetic Research -

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