含Capping结构的高活性mRNA
CleanCap® mRNA
TriLink BioTechnologies开发的CleanCap® mRNA是一种包被了特定蛋白的加帽mRNA。
本系列产品有Cas9、Cre、EGFP、Luciferase、mCherry、β-gal、EPO、OVA（ovalbumin）可供选择。
TriLink公司的CleanCap® mRNA能够作为高活性的mRNA使用，通过Capping（加帽）避免生物体内发生免疫应答，改善in vivo条件下的翻译效率。
◆CleanCap® 是什么？：为mRNA添加Cap 1 结构
TriLink公司的CleanCap® mRNA可以通过在mRNA上添加Capping结构（Cap 1）来避免生物体内发生免疫应答，从而合成具有高翻译效率的mRNA。
◆TriLink公司的CleanCap® mRNA特点
1. 加帽效率高达94%+，可获得更高活性的mRNA。
2. 不会激活模式识别受体，可避免免疫应答
3. 相较于Cap 0结构（ARCA法加帽），in vivo条件下的翻译效率得到了大幅改善
4. 相较于酶加帽法，所需成本大幅降低
5. 加帽修饰mRNA产品系列丰富
◆CleanCap®和ARCA(Anti-reverse capping analog)法的比较
将从以下两点比较ARCA法和CleanCap®加帽的mRNA。
● 加帽效率
● 细胞内蛋白的表达量
加帽效率的比较
分别使用CleanCap®和ARCA加帽表达Fluc的mRNA，比较两者的加帽效率。
结果显示，使用CleanCap® 获得的加帽效率比ARCA法高。
CleanCap® | ARCA |
90-99% | 60-80% |
细胞内蛋白表达水平的比较
分别使用CleanCap®和ARCA法加帽表达EGFP的mRNA后，使其在细胞内表达，并通过荧光显微镜进行观察。
比较以下5种细胞：CHO cells、Foreskin fibroblast cells、iPS derived cardiomyoctyes、Jurkat、MCF 10A
结果显示，无论在哪一种细胞中，使用CleanCap®加帽的EGFP mRNA的蛋白表达水平都更高。
ARCA EGFP mRNA | CleanCap® EGFP mRNA | |
CHO Cells 6 minute fusion Fuse-It-mRNA Kit 1μg mRNA |
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Foreskin fibroblast cells, |
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iPS derived cardiomyoctyes, |
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Data courtesy of Beniag | ||
ARCA EGFP mRNA | CleanCap® EGFP mRNA | |
Jurkat: 500ng |
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MCF 10A: 500ng |
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Data courtesy of Polyplus-transfection | ||
CleanCap®与酶加帽法的制备成本比较
计算4 mL（2 mg）和1 mL（400 μg）两种规格制备加帽mRNA时所需的成本。
结果显示，CleanCap®与酶加帽法相比，生产成本更低。
◆与修饰mRNA的组合：置换尿苷
为使mRNA能够高效表达，需最大限度地去除mRNA序列中的Uridine（尿苷），并将残留的Uridine置换为Pseudo Uridine（PseudoU，假尿苷）或5-methoxy Uridine(5moU，5-甲氧基尿苷)。
TriLink公司可提供多种CleanCap®与Pseudo Uridine、5-methoxy Uridine组合的mRNA产品。
Thp-1 Dual Cells (InvivoGen)
准备2种表达Fluc的mRNA，正常序列（Standard Fluc）与尽可能去除尿苷的序列（U depleted Fluc），比较两者的表达水平。
此外，在没有进行尿苷置换（wt）、置换为Pseudo Uridine（PseudoU）和置换为5-methoxy Uridine（5moU）的条件下进行比较。
结果显示，在U depleted Fluc（尽可能去除尿苷的序列）和置换为5-methoxy Uridine（5moU：甲氧基尿苷）的序列中，Fluc的表达水平更高。
◆RNA定制合成服务
TriLink公司可提供RNA定制合成服务：化学合成短链RNA服务、转录合成长链RNA。定制项目包含加帽、修饰碱基、缓冲液组成、纯化方法开发等。从使用修饰碱基的向导RNA合成到大规模mRNA合成服务均可提供，可满足客户广泛的需求。
mRNA定制合成（in vitro转录合成）的服务内容
目标回收量：1 mg~
修饰碱基：Pseudouridine, 5-Methoxyuridine, 5-Methylcytidine/Pseudouridine等
加帽试剂：CleanCap®
定制示例
● 只需ORF序列的mRNA合成
● UTR序列和ORF序列的mRNA合成
欢迎与我们联系，进一步了解定制服务。
◆关于TriLink BioTechnologies
TriLink BioTechnologies是一家位于美国圣地亚哥的试剂、药物生产定制公司，专注于核酸、寡核苷酸、加帽类似物的生产和长链RNA合成。
CleanCap® mRNA是TriLink研发的新型共转录加帽法，与常规加帽法相比，可实现高加帽效率和高蛋白表达效率。
TriLink生产符合ICH Q7以及ISO 9001:2015。
◆产品列表
Cas9 mRNA
产品编号 | 产品名称 | 产品规格 |
550-33824 | CleanCap Cas9 mRNA | 1 mg |
552-33823 | 100 μg | |
558-33744 | CleanCap Cas9 mRNA (5moU) | 1 mg |
550-33743 | 100 μg | |
555-33754 | CleanCap Cas9 Nickase mRNA (5moU) | 1 mg |
551-33751 | 20 μg | |
557-33753 | 100 μg |
Cas9 mRNA是在Broad、MIT、Harvard、Iowa、UTokyo以及Rockefeller授予的限制性许可下提供的产品。
Cre mRNA
产品编号 | 产品名称 | 产品规格 |
555-33793 | CleanCap Cre mRNA (5moU) | 1 mg |
559-33791 | 100 μg |
EGFP mRNA
产品编号 | 产品名称 | 产品规格 |
555-33793 | CleanCap EGFP mRNA | 1 mg |
559-33791 | 100 μg | |
552-33703 | CleanCap EGFP mRNA (5moU) | 1 mg |
556-33701 | 100 μg |
mCherry mRNA
产品编号 | 产品名称 | 产品规格 |
556-33723 | CleanCap mCherry mRNA (5moU) | 1 mg |
550-33721 | 100 μg |
Luciferase mRNA
产品编号 | 产品名称 | 产品规格 |
555-33813 | CleanCap FLuc mRNA | 1 mg |
559-33811 | 100 μg | |
559-33713 | CleanCap FLuc mRNA (5moU) | 1 mg |
553-33711 | 100 μg | |
553-33733 | CleanCap Renilla mRNA (5moU) | 1 mg |
557-33731 | 100 μg |
β-gal mRNA
产品编号 | 产品名称 | 产品规格 |
559-33833 | CleanCap beta gal mRNA | 1 mg |
553-33831 | 100 μg | |
554-33763 | CleanCap beta gal mRNA (5moU) | 1 mg |
558-33761 | 100 μg |
EPO mRNA
产品编号 | 产品名称 | 产品规格 |
559-33774 | CleanCap EPO mRNA (5moU) | 1 mg |
551-33773 | 100 μg |
OVA mRNA
产品编号 | 产品名称 | 产品规格 |
558-35503 | CleanCap Ova mRNA | 1 mg |
552-35501 | 100 μg | |
558-33783 | CleanCap Ova mRNA (5moU) | 1 mg |
552-33781 | 100 μg |
◆相关产品
加帽试剂
产品编号 | 产品名称 | 产品规格 |
559-35511 | CleanCap Reagent AG | 1 μmol |
553-35514 | 5 μmol | |
555-35513 | 10 μmol | |
553-35531 | CleanCap Reagent (3' OMe) AG | 1 μmol |
557-35534 | 5 μmol | |
559-35533 | 10 μmol |
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