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CUBIC-L, R+(M) Trial Kit
第二代CUBIC组织透明化试剂

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第二代CUBIC组织透明化试剂



CUBIC (Clear, Unobstructed Brain/Body Imaging Cocktails and Computational Analysis)是组织透明化技术的一种,由东京大学大学院医学系研究科上田泰己老师、顺天堂大学大学元医学研究科·医学部洲崎悦老师等人开发。

 

与第一代CUBIC相比,第二代CUBIC提高了透明度,对第一代CUIBC(CUBIC Trial Kit)的成分进行了更新。

FUJIFILM Wako可提供对应第二代CUBIC组织透明化试剂CUBIC-L, R+(M) Trial Kit。



◆特点

● 由对应第二代CUBIC的4种溶液组成

 可透明化小鼠和狨猴的组织以及全身,人组织块等

 透明度比第一代CUBIC(CUBIC Trial Kit)高

※ “希望确认透明化过程”,“更好地制备样品”的用户,可使用CUBIC Trial Kit(第一代CUBIC)。



◆适用样品(例)


 小鼠组织(包含大脑)和全身

 狨猴组织(包含大脑)和全身

 人组织块



除本产品以外所需的工具


实验用具


 解剖用剪刀和钳子

 锥形管(请根据样品选择)

 摇床

 药匙(金属制)

 观察用显微镜(共聚焦显微镜、光片显微镜等)

 


试剂


 PBS (-)

 D-PBS

 多聚甲醛



◆实验步骤


小鼠全脑


工序

试剂

温度

时间

摘除内脏、灌注固定

抽血

D-PBS

4°C

<5min

灌流

4% PFA

4°C

<5min

固定

4% PFA in PBS

4°C

12-24 h

脱脂、脱色

清洗

0.01% NaN3 in PBS

RT

>2 h×2 

前期置换

50% CUBIC-L Solution

37℃

>6 h

脱脂、脱色

50% CUBIC-L Solution

37℃

2-5 days

清洗

清洗

PBS

RT

>2 h×3 

折射率调整

前期置换

50% CUBIC-R+(M)Solution

RT

>6 h

折射率调整

50% CUBIC-R+(M)Solution

RT

过夜

CUBIC-R+(M) Solution

RT

24 h

观察

观察

Mounting Solution




根据样品的大小和种类,适用的实验方案不同,请根据样品调整使用量和处理时间。推荐的试剂用量为试管横放时样品可浸泡于试剂中(试管体积的1/2-2/3)。若将小鼠全脑(约0.5g)放入25 mL锥形管时,推荐使用10-13 mL左右的CUBIC-L或R+(M) Solution进行处理。



◆小鼠大脑的第二代CUBIC透明化实例


荧光蛋白表达与细胞核染色的组合


03071_img02.png


使用本产品对CAG-EGFP Tg小鼠全脑进行透明化处理,并使用专用的染色试剂盒进行细胞核染色(RedDot2)。在光片显微镜下对染色后的样品进行观察。

(本数据由顺天堂大学研究生院医学研究科·医学部 洲崎悦生老师提供)



细胞核染色与免疫染色的组合


03071_img03.png


使用本产品对B6N小鼠全脑进行透明化处理后,再使用专用的染色试剂盒进行细胞核染色(SYTOX-G)和免疫染色(NeuN-A594)。染色后在光片显微镜下对样品进行观察。

(本数据由顺天堂大学研究生院医学研究科·医学部 洲崎悦生老师提供)

※ 细胞核染色以及免疫组织染色需要使用单独的试剂,详情请与我们联系。



◆产品列表


产品编号

产品名称

产品等级

产品规格

298-85101

CUBIC-L, R+(M) Trial Kit
 CUBIC-L, R+(M)试剂盒小包装

组织透明化用

1 Kit



相关产品


CUBIC Trial Kit(第一代CUBIC)


产品编号

产品名称

产品等级

产品规格

290-80801

CUBIC Trial Kit 

CUBIC试剂盒小包装

组织透明化用

1 Kit



PBS


产品编号

产品名称

产品等级

产品规格

164-25511

1×PBS(-)

1×PBS(-)平衡缓冲液

生化学用

5 L

163-25265

10×PBS(-)

10×PBS(-)缓冲液

细胞培养用

500 mL

164-28713

PBS(-), Powder, for 1L

PBS(-), 粉末, 1L用

生化学用

1 L用×20

166-23555

PBS(-),

细胞培养用

500 mL

164-23551

500 mL×10



D-PBS


产品编号

产品名称

产品等级

产品规格

043-29791

D-PBS(-)

杜氏磷酸盐缓冲液

细胞培养用

1 L

045-29795

500 mL

049-29793

500 mL×10

048-29805

10×D-PBS(-)

10×杜氏磷酸盐缓冲液

细胞培养用

500 mL



※ 本页面产品仅供研究用,研究以外不可使用。




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