CUBIC-L, R+(M) Trial Kit
第二代CUBIC组织透明化试剂
CUBIC (Clear, Unobstructed Brain/Body Imaging Cocktails and Computational Analysis)是组织透明化技术的一种,由东京大学大学院医学系研究科上田泰己老师、顺天堂大学大学元医学研究科·医学部洲崎悦老师等人开发。
与第一代CUBIC相比,第二代CUBIC提高了透明度,对第一代CUIBC(CUBIC Trial Kit)的成分进行了更新。
FUJIFILM Wako可提供对应第二代CUBIC组织透明化试剂CUBIC-L, R+(M) Trial Kit。
◆特点
● 由对应第二代CUBIC的4种溶液组成
● 可透明化小鼠和狨猴的组织以及全身,人组织块等
● 透明度比第一代CUBIC(CUBIC Trial Kit)高
※ “希望确认透明化过程”,“更好地制备样品”的用户,可使用CUBIC Trial Kit(第一代CUBIC)。
◆适用样品(例)
● 小鼠组织(包含大脑)和全身
● 狨猴组织(包含大脑)和全身
● 人组织块
◆除本产品以外所需的工具
实验用具
● 解剖用剪刀和钳子
● 锥形管(请根据样品选择)
● 摇床
● 药匙(金属制)
● 观察用显微镜(共聚焦显微镜、光片显微镜等)
试剂
● PBS (-)
● D-PBS
● 多聚甲醛
◆实验步骤
小鼠全脑
工序 | 试剂 | 温度 | 时间 |
摘除内脏、灌注固定 | |||
抽血 | D-PBS | 4°C | <5min |
灌流 | 4% PFA | 4°C | <5min |
固定 | 4% PFA in PBS | 4°C | 12-24 h |
脱脂、脱色 | |||
清洗 | 0.01% NaN3 in PBS | RT | >2 h×2 |
前期置换 | 50% CUBIC-L Solution | 37℃ | >6 h |
脱脂、脱色 | 50% CUBIC-L Solution | 37℃ | 2-5 days |
清洗 | |||
清洗 | PBS | RT | >2 h×3 |
折射率调整 | |||
前期置换 | 50% CUBIC-R+(M)Solution | RT | >6 h |
折射率调整 | 50% CUBIC-R+(M)Solution | RT | 过夜 |
CUBIC-R+(M) Solution | RT | 24 h | |
观察 | |||
观察 | Mounting Solution |
根据样品的大小和种类,适用的实验方案不同,请根据样品调整使用量和处理时间。推荐的试剂用量为试管横放时样品可浸泡于试剂中(试管体积的1/2-2/3)。若将小鼠全脑(约0.5g)放入25 mL锥形管时,推荐使用10-13 mL左右的CUBIC-L或R+(M) Solution进行处理。
◆小鼠大脑的第二代CUBIC透明化实例
荧光蛋白表达与细胞核染色的组合
使用本产品对CAG-EGFP Tg小鼠全脑进行透明化处理,并使用专用的染色试剂盒进行细胞核染色(RedDot2)。在光片显微镜下对染色后的样品进行观察。
(本数据由顺天堂大学研究生院医学研究科·医学部 洲崎悦生老师提供)
细胞核染色与免疫染色的组合
使用本产品对B6N小鼠全脑进行透明化处理后,再使用专用的染色试剂盒进行细胞核染色(SYTOX-G)和免疫染色(NeuN-A594)。染色后在光片显微镜下对样品进行观察。
(本数据由顺天堂大学研究生院医学研究科·医学部 洲崎悦生老师提供)
※ 细胞核染色以及免疫组织染色需要使用单独的试剂,详情请与我们联系。
◆产品列表
产品编号 | 产品名称 | 产品等级 | 产品规格 |
CUBIC-L, R+(M) Trial Kit | 组织透明化用 | 1 Kit |
相关产品
CUBIC Trial Kit(第一代CUBIC)
产品编号 | 产品名称 | 产品等级 | 产品规格 |
CUBIC Trial Kit CUBIC试剂盒小包装 | 组织透明化用 | 1 Kit |
PBS
产品编号 | 产品名称 | 产品等级 | 产品规格 |
1×PBS(-) 1×PBS(-)平衡缓冲液 | 生化学用 | 5 L | |
10×PBS(-) 10×PBS(-)缓冲液 | 细胞培养用 | 500 mL | |
PBS(-), Powder, for 1L PBS(-), 粉末, 1L用 | 生化学用 | 1 L用×20 | |
PBS(-), | 细胞培养用 | 500 mL | |
500 mL×10 |
D-PBS
产品编号 | 产品名称 | 产品等级 | 产品规格 |
D-PBS(-) 杜氏磷酸盐缓冲液 | 细胞培养用 | 1 L | |
500 mL | |||
500 mL×10 | |||
10×D-PBS(-) 10×杜氏磷酸盐缓冲液 | 细胞培养用 | 500 mL |
※ 本页面产品仅供研究用,研究以外不可使用。
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