水平连接细胞共培养板

UniWells™ Horizontal Co-Culture Plate

UniWells™ Horizontal Co-Culture Plate是两个孔的水平连接型新型共培养容器。

传统共用培养液的代表性容器，是一种称为插入式细胞培养器的上下重叠型培养容器。该容器的缺点在于细胞底部材质的不同会导致细胞行为的差异，无法同时在显微镜下观察相互间的细胞。除此以外，由于细胞位于滤膜上方，细胞数量增加会降低共培养效果。而且，容器之间容量的巨大差异，会使培养液中分泌的物质稀释，导致共培养效率不高。为了解决这些缺点，我们制作了新型的横向连接式细胞培养容器。

不仅解决了之前难以同时观察相互作用的问题，还可进行有效的共培养。容器尺寸为普通的制剂尺寸，适用于各种研究器械。可自由选择直径为13 mm的各种滤膜，适配多种多样的共培养实验。

◆特点

●　可以使用显微镜方便且同时观察两边细胞

●　孔之间的滤膜不易堵塞

●　可单独培养各种细胞

◆套装组成

UniWells™ Horizontal Co-Culture Plate (384-14421)

Main Body A        ············· 2 Main Body B        ············· 2  Cover                   ············· 4  Common Cover   ············· 4  Adapter               ············· 1  O-ring                 ············· 2   [Note] The filters are sold separately

◆水平共培养的优点是什么？

1） 实验培养基量相同

2） 细胞不会堵塞滤膜

◆应用实例

外泌体摄取

使用UniWells™ Horizontal Co-Culture Plate进行实验，检测细胞释放的外泌体扩散后，能否通过滤膜被另外的细胞摄取。

通过使用UniWells™ 无需混合细胞，并且可以只让外泌体通过滤膜。通过使用UniWells™ 可以简易地检测外泌体是否被另一种的细胞摄取。

外泌体渗透率的比较

在传统共培养容器和UniWells™共培养容器的两边培养皿分别接种相同数量的细胞。细胞接种24 h后开始共培养。接种48 h后，用NanoSight分别检测两个共培养器中的外泌体。本实验的培养基量相同。

与传统共培养容器相比，UniWell™共培养容器中通过滤膜的外泌体数量更多。

◆使用方法

连接使用

连接方法有以下两种

A） 将单独培养过的孔中的培养基引过去并连接

B） 一开始连接后，增加培养基的量至共培养状态

单独使用

用于显微镜

◆培养基容量

培养基容量的概略图

从底部到不共通的水平面的高度约为6 mm。实际上，由于还有观察的厚度，因此高度只有5 mm左右。按液体容积计算，400 μL接近非共通液面界限。若是300 μL，液面就会位于结合部位以下。根据对接与移动时的震动所带来的溶液表面张力，有时候400 μL也会到达对接部位。

共通时的培养液容量，约为1800 μL至2000 μL。培养液过多的话，会黏附到盖子上，因此，请仔细观察添加不沾到盖子上容量的培养液。放置滤膜的情况下，请添加培养液直至覆盖整个滤膜。

单独培养可以盖上侧面的盖子，但在对接状态下，只要培养液容量低于400 μL，则可在非共通状态下进行培养。

只要添加足够的培养液即可随时实现共培养。若非长时间培养，400 μL的培养液即可满足培养需求。

◆产品列表

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※ 本页面产品仅供研究用，研究以外不可使用。

疑难解答

1.　产品的材质是什么？

UniWells™ 主体的材质是聚苯乙烯，通用盖的材质是低密度聚苯乙烯。另外滤膜（另售）使用的是蛋白难以吸附的聚碳酸酯。

２.　需要灭菌吗？

包装后进行了电子束灭菌所以不需要灭菌。由于聚苯乙烯和低密度聚苯乙烯的耐热温度低，所以不能高压灭菌。原则上本产品不可回收利用。

３.　有涂层吗？

UniWells™ 没有涂层，请根据需求进行涂层。

４.　接种的细胞数有标准吗？

Ginrei Lab向每个孔中添加190 μL制备成5×104 个/mL 的NHDF（人成纤维细胞）和PANC-1（人胰腺癌培养细胞）。24 h后，细胞贴壁时，约40%~50%的细胞进行了汇合。但是适当的细胞数根据实验和细胞的种类会有很大的差异，需要根据条件进行讨论。

５.　可以用什么样的显微镜进行观察？

UniWells™ 和载玻片尺寸相同，可用各种显微镜进行观察。CQ1（横河电机株式会社），JuLI™ Stage（Air Brown 公司）的显微镜制造商也已经确认可以使用。

６.　需要多长时间令共培养中两孔的溶液均一？

使用UniWells™ Filter 0.6 µm（产品编号：388-14441）时，葡萄糖需要24 h达到相同浓度。蛋白48 h大概溶合70%。

７.　为什么置入滤膜的实验中，体液因子的通过量很少？

蛋白以及外泌体等物质会黏附在滤膜、容器、提取试剂盒上。在阳性对照样品中充分回收的情况下（提取过程没有问题），请先确认培养条件以及滤膜的处理。经常出现的问题是，①培养液过少，以及②滤膜未充分脱气。

①　培养液过少的情况：滤膜与培养液的接触面积减少，会显著地降低共培养效果。

②　滤膜未充分脱气的情况下：使用前不充分脱气，会使空气残留在孔中将其堵塞，降低共培养效果。

【脱气方法】

将滤膜浸入使用的培养液中约5 min，用小镊子夹住滤膜，充分洗涮后取出。

※建议※　浸入培养液前使用70%乙醇处理3 min，或浸入培养液中使用超声波震动脱气更为有效。