DNA提取和纯化试剂

分子生物学在生命科学领域的发展中发挥着重要的作用，而DNA相关实验正是其核心。在DNA相关实验中，核酸的高效纯化是影响实验结果的重要因素之一。FUJIFILM Wako可提供动物、植物、微生物以及胶回收等的 DNA 提取和纯化试剂。

◆DNA提取和纯化的基本操作及原理

DNA的提取和纯化是基因工程和基因分析的第一步，获得尽可能高回收量和高纯度的DNA，关系到后续实验的成功。

目前，针对各种生物和样品的DNA提取和纯化方法有很多，但基本上是通过以下三个阶段进行的：

●　细胞的裂解

DNA提取和纯化的第一步是细胞的裂解。用表面活性剂、变性剂、强碱等化学处理或热处理裂解细胞膜。对于具有细胞壁的植物和细菌等，需要用酶分解细胞壁或用玻璃磁珠物理破坏细胞壁。

●　去除杂质

除 DNA 外，细胞中还含有蛋白质、RNA等各种杂质。蛋白质用变性剂使其变性，或用蛋白酶进行分解。RNA用RNA酶进行分解。此外，通过苯酚提取或苯酚/氯仿提取，使DNA和杂质（蛋白质等）分离。在中性条件下，加入苯酚或苯酚/氯仿后，DNA会被转移至水相，因此只需分离水相即可实现DNA的分离。

除了经典方法之外，日本基因ISOSPIN系列DNA提取试剂盒，利用了DNA在离液离子（胍盐离子等）存在的条件下会吸附于硅胶膜的原理（Boom Technology）。将含有离液离子的结合缓冲液添加至细胞的裂解液，使其通过附在离心柱上的硅胶膜，DNA会吸附在硅胶膜上，而其他杂质直接通过，因此能够有效地去除杂质。

●　用乙醇清洗和溶解·洗脱

需要去除残留在DNA 溶液中的盐类和酚类。将乙醇和盐（如钠盐和铵盐等）添加至DNA 溶液并进行离心，可以使DNA沉淀。这是由于盐中和了 DNA 的负电荷，使亲水性高的 DNA 在乙醇下更容易聚集，并且通过离心更容易发生沉淀（乙醇沉淀）。之后，去除乙醇并将DNA沉淀溶解于水或TE缓冲液中，以获得高纯度的DNA。

使用硅胶膜的方法，也可以通过以乙醇为主要成分的洗涤缓冲液来去除盐等。最后，在硅胶膜上加入水或TE缓冲液后，DNA可以从硅胶膜上分离出来，从而洗脱出高纯度的DNA。

◆参考文献

1. 平尾一郎, 胡桃坂仁志 編：「目的別で選べる核酸実験の原理とプロトコール」 (羊土社) (2011).

2. Green, R. M. and Sambrook, J.：”Molecular Cloning A Laboratory Manual, 4th ed.”, Cold Spring Harbor Laboratory Press (2012).

◆产品列表

DNA Extractor^® Kit系列（碘化钠法）

mtDNA Extractor^® CT Kit

日本基因  DNA提取试剂（质粒DNA）

日本基因  DNA提取试剂（PCR产物）

蛋白酶K

共沉淀剂

※ 本页面产品仅供研究用，研究以外不可使用。